論文の残滓

特許実務に関するあれこれ。

JP Patent status and claim 1 of Broad's CRISPR-Cas9 Patents.

ゲノム編集特許 備忘録

Broadの日本特許３件

 

特許第6203879号

【請求項１】
クラスター化等間隔短鎖回分リピート（ＣＲＩＳＰＲ）－ＣＲＩＳＰＲ関連（Ｃａｓ）（ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ）ベクター系であって、
Ｉ． ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系キメラＲＮＡ（ｃｈｉＲＮＡ）ポリヌクレオチド配列をコードするヌクレオチド配列に作動可能に結合している第１の調節エレメントであって、
前記ポリヌクレオチド配列が、
（ａ）真核細胞中の標的配列にハイブリダイズする、１０～３０ヌクレオチドの長さを有するガイド配列、
（ｂ）トランス活性化ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｔｒａｃｒ）メイト配列、及び
（ｃ）ｔｒａｃｒＲＮＡ配列
を含み、
（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）が、５’から３’配向で配置されており、
前記ｔｒａｃｒＲＮＡ配列が、５０以上のヌクレオチドの長さを有する、
第１の調節エレメントと、
ＩＩ． 真核細胞の核中の検出可能な量のＩＩ型Ｃａｓ９タンパク質の蓄積をドライブするために十分な強度の、１つ以上の核局在化配列を含む前記Ｃａｓ９タンパク質をコードするヌクレオチド配列に作動可能に結合している第２の調節エレメントと
を含む１つ以上のベクターを含み；
成分Ｉ及びＩＩは、前記系の同じ又は異なるベクター上に位置し；
前記ヌクレオチド配列が転写されると：
前記ｃｈｉＲＮＡは、前記ＩＩ型Ｃａｓ９タンパク質へと集合し、前記ＩＩ型Ｃａｓ９タンパク質と複合体を形成し、
前記ｔｒａｃｒメイト配列は、前記ｔｒａｃｒＲＮＡ配列にハイブリダイズし、
前記ガイド配列は、前記真核細胞中の前記標的配列への配列特異的結合を指向し、
それによって、（１）前記真核細胞中の前記標的配列にハイブリダイズされる前記ガイド配列、及び（２）前記ｔｒａｃｒＲＮＡ配列にハイブリダイズされる前記ｔｒａｃｒメイト配列と複合体形成している前記ＩＩ型Ｃａｓ９タンパク質を含むＣＲＩＳＰＲ複合体が形成される、
ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓベクター系。

 

・II型CRISPR-Cas9

・ハイブリダイズの長さ限定

・tracrRNAの長さ限定

特許第6420273号
【請求項１】
  エンジニアリングされた、天然に存在しないクラスター化等間隔短鎖回分リピート（ＣＲＩＳＰＲ）－ＣＲＩＳＰＲ関連（Ｃａｓ）（ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ）ベクター系であって、
  ａ）ガイド配列、ｔｒａｃｒＲＮＡ及びｔｒａｃｒメイト配列を含む１つ以上のＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系ポリヌクレオチド配列をコードする１つ以上のヌクレオチド配列に作動可能に結合している第１の調節エレメントであって、前記ガイド配列は、真核細胞中のポリヌクレオチド遺伝子座中の１つ以上の標的配列にハイブリダイズする、第１の調節エレメント、
  ｂ）ＩＩ型Ｃａｓ９タンパク質をコードするヌクレオチド配列に作動可能に結合している第２の調節エレメント
を含む１つ以上のベクターを含み、
  成分（ａ）及び（ｂ）は、前記系の同じ又は異なるベクター上に位置し、
  前記ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系は、前記Ｃａｓ９タンパク質をコードする前記ヌクレオチド配列とともに発現される２つ以上の核局在化シグナル（ＮＬＳ）を含み、少なくとも１つのＮＬＳが、前記Ｃａｓ９タンパク質のアミノ末端に若しくはその付近に存在し、及び、少なくとも１つのＮＬＳが、前記Ｃａｓ９タンパク質のカルボキシ末端に若しくはその付近に存在し、
  それによって、前記１つ以上のガイド配列が、真核細胞中の前記１つ以上のポリヌクレオチド遺伝子座を標的とし、前記Ｃａｓ９タンパク質が、前記１つ以上のポリヌクレオチド遺伝子座を開裂し、それによって、前記１つ以上のポリヌクレオチド遺伝子座の配列が、改変される、
ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓベクター系。

・II型CRISPR-Cas9
・NLSが２つ以上

・N末端、C末端にNLS一個ずつ配置

 

特許第6395765号

ＣＲＩＳＰＲ複合体成分を含む組成物であって、
前記ＣＲＩＳＰＲ複合体成分が、
Ｉ． ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系ポリヌクレオチド配列（複数の場合も有り）であって、
（ａ）ＲＮＡを含み、ポリヌクレオチド遺伝子座中の標的配列にハイブリダイズし得る、エンジニアリングされたガイド配列、
（ｂ）ＲＮＡを含むｔｒａｃｒメイト配列、及び
（ｃ）ＲＮＡを含むｔｒａｃｒＲＮＡ配列
を含み、
（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）が、５’～３’配向で配置されている、
ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系ポリヌクレオチド配列、
ＩＩ． ＩＩ型Ｃａｓ９タンパク質
を含み、
前記ｔｒａｃｒメイト配列が、前記ｔｒａｃｒＲＮＡ配列にハイブリダイズし、前記ガイド配列が、標的配列へのＣＲＩＳＰＲ複合体の配列特異的結合を指向し、
前記ＣＲＩＳＰＲ複合体が、前記ＩＩ型Ｃａｓ９タンパク質であって、（１）前記標的配列にハイブリダイズされる前記ガイド配列及び（２）前記ｔｒａｃｒＲＮＡ配列にハイブリダイズされる前記ｔｒａｃｒメイト配列と複合体形成している、前記ＩＩ型Ｃａｓ９タンパク質を含み、
前記ＩＩ型Ｃａｓ９タンパク質が、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）Ｃａｓ９（ＳａＣａｓ９）である又はこれを含む、

 

・小型Cas9（SaCas9）